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穩(wěn)定碳?xì)渫凰卦诟探郛a(chǎn)地溯源中應(yīng)用初探

點(diǎn)擊次數(shù):1662 發(fā)布時(shí)間:2016-06-29

中國(guó)是柑桔的重要原產(chǎn)地之一,有4000多年的栽培歷史。柑桔色彩鮮艷、酸甜可口,是常見的美味佳果。然而我國(guó)柑桔資源豐富,無論是栽培品種,還是野生、半野生種以及天然或人工育成的雜交類型等都極為繁多,形態(tài)復(fù)雜,即使不同地域出產(chǎn)的柑桔外形上也十分相近。光從外觀和口感上很難區(qū)分其產(chǎn)地來源,而柑桔的各種營(yíng)養(yǎng)成分、理化指標(biāo)也大同小異,無法作為其產(chǎn)地來源的檢驗(yàn)依據(jù)。由于目前常用的理化分析方法及質(zhì)量指標(biāo)(可溶性固形物、糖類和氨基酸態(tài)氮等)難以對(duì)這兩種果汁進(jìn)行區(qū)分,柑桔的產(chǎn)地溯源有利于保護(hù)原產(chǎn)地,保護(hù)地區(qū),保護(hù)特色產(chǎn)品,確保公平競(jìng)爭(zhēng),增強(qiáng)消費(fèi)者對(duì)食品安全的信心,并能有效防止食源性病源的擴(kuò)散。因此,須建立一種穩(wěn)定、有效的溯源檢測(cè)方法能的判斷柑桔的來源產(chǎn)地。 
  同位素溯源技術(shù)是上目前用于追溯不同來源食品和實(shí)施產(chǎn)地保護(hù)的一種有效工具,植物組織中的同位素組成直接與其生長(zhǎng)的地理環(huán)境與氣候環(huán)境密切相關(guān),其中主要受地形的高度、緯度,大氣壓力、溫度、濕度、降雨量等因素的影響。目前,通過檢測(cè)同位素豐度的方法判斷產(chǎn)地來源的植物源產(chǎn)品主要包括果汁、飲料、酒、 、尼古丁、丹參等[1~3]。早在20世紀(jì)末,發(fā)達(dá)國(guó)家即著手穩(wěn)定同位素技術(shù)在食品真實(shí)性鑒別方面的研究,并取得了多項(xiàng)成果[4]。20世紀(jì)70年代,法國(guó)Bricout在對(duì)比NCF果汁和濃縮還原果汁的水中δD的研究中發(fā)現(xiàn)NFC果汁中明顯富集δD的現(xiàn)象[5];德國(guó)Don-gmann的研究表明蒸騰作用使植物細(xì)胞組織內(nèi)的水分子中富集δD[6]。 
  國(guó)內(nèi)應(yīng)用穩(wěn)定同位素鑒別食品真實(shí)性的研究雖起步較晚,但也取得了初步成果 :1994年,馬希漢介紹了碳?xì)溲跬凰卦诠鎸?shí)性鑒別領(lǐng)域的應(yīng)用原理[7];2008年,牛麗影在實(shí)驗(yàn)條件下研究了NFC果汁和濃縮還原果汁的氫氧同位素差異[8];2011年鐘其頂利用氫和氧穩(wěn)定同位素實(shí)現(xiàn)NFC橙汁和濃縮還原橙汁的有效鑒別[9]。但穩(wěn)定性碳?xì)渫凰赜糜谥参镌葱允称樊a(chǎn)地溯源的應(yīng)用研究較少,利用碳?xì)浞€(wěn)定同位素判斷柑桔產(chǎn)地的研究還未見報(bào)道。本試驗(yàn)分析了來自我國(guó)四大產(chǎn)區(qū)的柑桔中碳?xì)浞€(wěn)定同位素的組成差異,探討了穩(wěn)定性碳?xì)渫凰刂笜?biāo)用于柑桔產(chǎn)地溯源的可行性。 
  1、試驗(yàn)材料與方法 
  1.1試驗(yàn)材料 
  柑桔:分別從廣西(永??h)、湖南(永州)、四川(新津縣)、福建(漳州)4個(gè)省的不同地區(qū)果園里采集,裝入自封袋中保藏,采樣點(diǎn)的具體情況見表1。 
  1.2主要儀器設(shè)備 
  MAT253 穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜儀(德國(guó)Finnigan公司)。 
  1.3試驗(yàn)方法 
  1.3.1樣品前處理 選取新鮮、飽滿、無病斑、無劃痕的柑桔,去除果梗、果核和果皮,切成狀放入攪拌機(jī)中攪拌5min,2000r/min離心10min取上清液,制柑桔果汁冷藏待用。將果汁轉(zhuǎn)至蒸餾瓶?jī)?nèi),真空濃縮,餾出液作為測(cè)定氫同位素,濃縮果漿冷凍干燥,充分研磨粉末轉(zhuǎn)移至自封袋中,標(biāo)記后放人干燥器中保存作為測(cè)定碳同位素。 
  1.3.2穩(wěn)定性氫同位素比率檢測(cè) 按照DZ/T 0184.19-1997進(jìn)行同位素氫的測(cè)定,結(jié)果以δD表示: 
  δD‰ = (R樣品/R標(biāo)準(zhǔn) -1)×l 000 
  式中: 
  R樣品-----所測(cè)樣品中2H豐度與1H的豐度比; 
  R標(biāo)準(zhǔn)--- 標(biāo)準(zhǔn)樣品中2H豐度與1H的豐度比; 
  δD的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為V-SMOW。 
  1.3.3穩(wěn)定性碳同位素比率檢測(cè) 按照DZ/T 0184.17-1997進(jìn)行同位素碳的測(cè)定,計(jì)算公式為: 
  δ13C‰ = (R樣品/R標(biāo)準(zhǔn)-1)×l 000 
  式中: 
  R樣品-----所測(cè)樣品中13C豐度與12C的豐度比; 
  R標(biāo)準(zhǔn)--- 標(biāo)準(zhǔn)樣品中13C豐度與12C的豐度比; 
  δ13C的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)為V-PDB。 
  采用Excell軟件對(duì)柑桔果汁中δ13C和δD進(jìn)行相關(guān)性處理。 
  2、結(jié)果與分析 
  2.1不同地域來源柑桔果汁中的碳?xì)渫凰亟M成特征 
  測(cè)定了來自廣西、湖南、福建、四川地區(qū)的樣品δ13C和δD,結(jié)果如表2所示。 
  2.2柑桔果汁中碳同位素 
  4個(gè)地域之間柑桔果汁中碳同位素組成均有差異,大小依次排序?yàn)樗拇?gt;廣西>福建>湖南。湖南與廣西、四川樣品的碳同位素組成無重疊,而與福建樣品的碳同位素組成有部分重疊,湖南與福建樣品無顯著差異,而湖南、福建兩地與廣西、四川兩地樣品之間有極顯著差異,且四川、廣西樣品的δ13C值明顯高于福建、湖南的樣品。在陸生植物組織中13C/12C比發(fā)生變化的主要原因是由于植物固定CO2的方式不同。植物固定CO2可通過C3途徑(即卡爾文循環(huán))、C4途徑(即C4二羧酸途徑)和景天酸代謝(CAM)途徑。在C3途徑中,二氧化碳的受體是1,5一二磷酸核酮糖,它接受CO2后,在1,5一二磷酸核酮糖羧化酶的催化下,形成兩分子的3一磷酸甘油酸,因?yàn)樗侨蓟衔?,故稱C3途徑。柑桔為C3植物,C3光合途徑在二氧化碳的固定過程中顯示出很強(qiáng)的同位素效應(yīng),由于二磷酸核酮糖羧化酶的作用,C3植物偏向于對(duì)質(zhì)量較輕的碳同位素12C的吸收(同位素分餾率為29),它們的13C/12C比較小,δ13C的負(fù)值相應(yīng)較大,一般在-22‰~-33‰之間。 
  2.3柑桔果汁中氫同位素 
  不同地域柑桔果汁中δD同位素組成有極顯著差異,排序依次為廣西>湖南>福建>四川,δD值有顯著的相關(guān)性,柑桔果汁的δD值有隨著地理緯度增加而減小的趨勢(shì)。柑桔果汁都比純凈水富集δD,這是由于蒸騰作用使植物組織內(nèi)的水富集δD。其中柑桔果汁中δD比純凈水高約50%,這與馬希漢介紹的情況相符。造成柑桔果汁中和有差異的原因,有兩方面:其一,是果樹生長(zhǎng)區(qū)域的地下水、地表水中氫同位素組成。陸地上的水分終來源于海洋,水循環(huán)中的蒸發(fā)、凝降過程都會(huì)導(dǎo)致氫氧同位素分餾,其中高緯度地區(qū)、高海拔地區(qū)以及距離海岸線遠(yuǎn) 
  的地區(qū)水中δD值比較低,果汁中的水歸根結(jié)底是根系吸收的地下水/地表水,其δD是果汁水中氫同位素組成的基礎(chǔ);其二,果樹的蒸騰作用會(huì)使植物組織內(nèi)部的水比地下水/地表水富集δD,其蒸騰作用強(qiáng)度受果樹生長(zhǎng)條件的影響,溫暖、干燥的地區(qū)蒸騰強(qiáng)度較大,更容易富集δD。因此,δD是判斷產(chǎn)品地理來源的工具[10]。 
  2.4δ13C和δD同位素溯源 
  以柑桔果汁中δ13C和δD數(shù)據(jù)為基礎(chǔ),用貝葉斯判別分析方法可將不同地域來源的柑桔區(qū)分開來,δ13C數(shù)據(jù)正確判別率對(duì)于廣西、湖南、福建、四川分別為80%、80%、60%、60%,整體平均正確判別率僅為70% ;δD數(shù)據(jù)正確判別率對(duì)于廣西、湖南、福建、四川均為100%。 
  3、結(jié)論 
  在本試驗(yàn)中,各地柑桔果汁中δ13C和δD數(shù)據(jù)顯著不同,不同地域來源的柑桔果汁δD值的差異顯著,有隨著地理緯度增加而減小的趨勢(shì)。因此,δD可作為判斷產(chǎn)品地理來源的一個(gè)有力指標(biāo),柑桔果汁中 同位素組成均可反映柑桔來源地的信息。在今后的研究分析中還可聯(lián)合δ18O、δ15N、δ34S等穩(wěn)定同位素指標(biāo)來進(jìn)行產(chǎn)地溯源,構(gòu)成柑桔的穩(wěn)定同位素產(chǎn)地溯源指紋圖譜,以提高穩(wěn)定同位素分析技術(shù)對(duì)柑桔產(chǎn)地溯源的性和實(shí)用性。

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